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下面河南一棋生物技術給您講講活體成像的應用前景:
活體成像技術能夠實現將分子生物學技術從體外研究轉移到動物體內研究。因該技術能夠觀測活體動物內的基因表達和細胞活動,并且該技術具有檢測靈敏度高,操作簡單等優勢,正在越來越廣泛地應用于醫學及生物學研究領域。
FAQ
(1)生物發光與熒光技術的比較
生物發光 | 熒光 | |
優點 | (1)高度靈敏 (2)成像速度快,圖像清楚 (3)在體內可檢測到102細胞 | (1)有多種蛋白和染料可用 (2)可進行多重標記,標記相對簡單 (3)可同時用于FACS分類 |
缺點 | (1)信號較弱,需要靈敏的CCD鏡頭 (2)對儀器的精密度要求較高 (3)需要注入熒光素 (4)目標細胞或者基因需要標記 | (1)非特異性熒光對其靈敏度產生限制 (2)體內檢測最低約106細胞 (3)需要不同波長的激發光 (4)很難精確體內定量 |
(2)如何能檢測到體內發出的可見光?
答:兩個主要的原因能夠保證可見光成像技術能夠檢測到體內發出的微弱的可見光。a:高靈敏度的制冷CCD鏡頭,可達到零下-105℃,體內發出的非常少的光子也能檢測得到。b:絕對密封的暗箱裝置,可以屏蔽包括射線在內的所有光線。
(3)大鼠可否用作活體成像實驗?
答:成體老鼠和裸鼠,幼鼠及胚胎的區別只在于對可見光的穿透性不同,可見光的穿透能力在3-4cm之間,所以大鼠也可以作為活體成像的動物,關于大鼠活體成像已有很多文章發表。
(4)CCD鏡頭的低溫會不會對小動物產生影響?
答:不會的,低溫的范圍只局限于CCD鏡頭的小范圍內,其他范圍內都是室溫。
(5)使用麻醉劑麻醉動物有什么優勢?
答:麻醉機麻醉系統相對于腹腔注射對于小鼠的麻醉在時間和精度上的控制更準確,使用也更加方便。
(6)用熒光素進行活體成像與綠色熒光蛋白檢測體內發光相比優勢何在?
答:熒光素酶的偏紅光比綠色熒光蛋白的綠光在體內的穿透性要強近100倍。熒光素是靠和熒光素酶的相互作用發光,特異性很強,得到的信噪比較高;熒光蛋白需要激發光來產生反射光,但是在檢測的過程中,老鼠的皮毛,皮膚都會產生非特異性熒光,使得信噪比降低。熒光蛋白檢測更適合于體外檢測,熒光素酶的檢測更適合于體內檢測。
(7)與傳統技術相比,生物發光成像技術優勢體現在哪些方面?
答:與傳統技術相比,該技術對于腫瘤轉移的研究、基因治療、流行病學的發病學研究,干細胞示蹤,白血病的相關研究等方面,用該技術進行腫瘤的藥效研究,比傳統方法更靈敏,還可以通過一系列轉基因動物疾病模型,來快速直觀的進行相關疾病的發病機理和藥物篩選研究。
(8)如何用熒光素酶基因標記干細胞嗎?
答:可標記組成性表達的基因,做成轉基因小鼠,干細胞就被標記了,從此小鼠的骨髓取出造血干細胞,移植到另外一只小鼠的骨髓內,可以用該技術示蹤造血干細胞在體內的增殖和分化及遷徙到全身的過程。另外一種方法是用慢病毒標記神經干細胞。
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